Curso Online de Identificação Básica de Microorganismos

Noções Básicas em Identificação de Microorganismos

Sobre o Professor – Titulação - Profissão

Prof. Marcelo Oliveira
Biomédico Hab. Análises Clínicas e Micologia
CRBM/PA: 1896

Identificando, fungos, bactérias e protozoários

BREVE INTRODUÇÃO

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A identificação básica de microorganismos pode acontecer por várias técnicas, desde simples semeio em placas contendo meios de culturas, passando por técnicas um pouco mais seletivas como o microcultivo e até meios mais específicos para cada tipo de microorganismos.
Neste curso abordaremos a identificação básica de três tipos de microorganismos: os fungos, bactérias de forma mais simples e protozoários.
Utilizaremos a identificação microscópica para a maioria deles e em alguns casos será utilizada técnicas de meios específicos para alguns tipos de fungos.

NOÇÕES EM IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS

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Neste curso iremos identificar as bactérias Gram positivas, Gram negativas, além de identificar suas características morfo-tintoriais como os bacilos, cocos e outros.
Algumas bactérias são identificadas em meios específicos e através de provas bioquímicas. Para melhor especificar isso deixamos aqui o link do Manual de Identificação de Bactérias Patogênicas da ANVISA (http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_5_2004.pdf), para que possam conhecer melhor sobre a identificação específica de cada bactéria de interesse médico.

Identificando bactérias em Gram positiva e Gram negativa

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Historicamente falando a mais de 100 anos atrás o microbiologista dinamasquês Hans Christian Gram, em seus esperimentos definiu esta técnica para a diferenciação de bactérias. Quando corou um esfregaço com voleta de genciada observou que as bactérias presentes no esfregaço não se desbotavam na presença de álcool se antes fossem tratadas com iodo.
Avançando em seus estudos Gram observou que quando adicionou safrina e fuccina pode detectar que as bactérias eram coradas em duas cores, assim às classifocou em Gram positiva e Gram negativa, quando se aproximavam do roxo ou quando eram próximas da cor vermelha respectivamente.

Técnica de Gram

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Neste momento para aprimorar cada vez mais os nossos conhecimentos nós vamos ensinar como fazer a técnica de Gram. Lembrando que: a técnica de Gram não serve apenas para a classificação de bactérias, mas também para ver leveduras em outras culturas.
A coloração de Gram se refere à composição da parede celular. As Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptideoglicano e ácido teicóico, e as Gram-negativas, uma fina camada de peptideoglicano, sobre a qual se encontra uma camada composta por lipoproteínas, fosfolipídeos, proteínas e lipopolissacarídeos.

Técnica

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Cobrir toda a lâmina com solução cristal violeta, aguardar um minuto;
Lavar rapidamente em água destilada;
Cobrir a lâmina com solução de lugol por um minuto;
Lavar em água destilada;
Inclinar a lâmina e gotejar álcool-acetona ou álcool absoluto (cerca de 15 segundos).
Lavar a lâmina rapidamente em água corrente;
Cobrir com fucsina de Gram e aguardar 30 segundos;
Lavar a lâmina em água destilada e secar (sem esfregar).
 

Morfologia básica das bactérias

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A parede celular bacteriana é composta por tetrapeptídeos, peptideoglicanos e inúmeros outros componentes lipídicos. Contudo esses componentes são responsáveis pela forma e coloração da parede bacteriana.

DE MODO GERAL, ELAS SE DIVIDEM EM:
Cocos: diplococos; estreptococos; estafilococos; tétrades; sarcinas.
Bacilos: isolado; diplobacilos; Paliçadas, estreptobacilos e cocobacilos.
Espiroladas: Espiroquetas; espirilos; vibriões.

COCOS

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DIPLOCOCOS (cocos aos pares). Ex:. Diplococos Gram negativos.

Patrícia Freitas, Yane Cabral e Ângela Veras – Microbiologia Didática

COCOS

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ESTREPTOCOCOS (cocos cadeias). Ex:. Estreptococos Gram positivos.

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COCOS

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ESTAFILOCOCOS (cocos em grupos). Ex:. Estafilococos Gram positivos e Gram negativos.

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COCOS

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TÉTRADES (cocos agrupados em dois planos e grupos de quatro). Ex:. Gram negativos.

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